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數字PCR定量檢測HBVcccDNA
點擊次數:2766 更新時間:2021-09-28
背景與目的:隱匿性乙型肝炎病毒感染(OBI)的準確診斷需要HBsAg陰性者肝活檢組織中HBVDNA的證實。然而,在臨床實踐中,潛伏的OBI是通過發現抗Hb核心抗原的抗體(抗HBc)而推斷出來的。我們調查了抗HBc陽性受試者中OBI的真實患病率和肝內HBV的分子特征。
方法:對100例標準血清學抗-HBc陽性的移植供者(平均年齡68.2歲;男64例,女36例),用巢式PCR檢測總HBVDNA,用數字PCR檢測HBVcccDNA(線性:R2=0.9998;定量和檢測下限分別為2.4和0.8拷貝/105細胞)。
結果:52%(52/100)的受試者存在真實的OBI狀態,52%(27/52)的OBI陽性者存在cccDNA,中位數為13拷貝/105細胞(95%可信區間5-25)。采用IgG型抗HBc特異性檢測,HBVcccDNA陽性獻血者的中位抗體水平顯著高于陰性獻血者
(5.7 [3.6-9.7] vs. 17.0 [7.0-39.2] COI, p=0.007)。經多因素分析,抗-HBc IgG值>4.4cccDNA與肝內HBVcccDNA的發現相關(OR=8.516,p=0.009),低于該值則排除其存在,陰性預測值為94.6%。
結論:采用一種新的基于ddPCR的內部檢測方法,在大約一半的OBI病例中,肝內HBV cccDNA可被定量檢測到。抗HBc IgG滴度可能是預測免疫抑制患者OBI再激活風險的有用指標。